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1. chinaXiv:202012.00030 [pdf]

松叶猪毛菜瞬时转化体系的建立及初步验证

夏春兰; 李亚楠; 闻志彬
Subjects: Geosciences >> Geography

松叶猪毛菜(Salsola laricifolia)是典型的荒漠C3-C4中间型植物,隶属于藜科(Chenopodiaceae)猪毛菜属,是研究C4途径进化以及光呼吸减少机制的最佳物种。以松叶猪毛菜无菌苗为试验材料,通过农杆菌介导的瞬时转化方法,分别对质粒载体、苗龄、农杆菌侵染浓度、侵染时间和乙酰丁香酮浓度进行研究,探究各因素对松叶猪毛菜植株瞬时遗传转化效率的影响,以确立最佳的瞬时转化体系;并在上述体系的基础上,过表达松叶猪毛菜叶绿体型NADP-苹果酸酶基因(SaNADP-ME1),通过GUS组织化学染色和荧光定量PCR验证瞬时转化效果。结果表明:(1)采用pCAMBIA1301构建表达载体,以30 d苗龄植株作为转化受体,在侵染液中添加200 μmol·L-1乙酰丁香酮,农杆菌菌液OD600为0.8,侵染6 h条件下,瞬时转化效率最佳(92%);(2)构建过表达载体并瞬时转化松叶猪毛菜植株,通过染色检测到GUS活性,并且荧光定量PCR检测到SaNADP-ME1的表达量相比对照组显著增高,该基因成功瞬时过表达转化至植株中。综上所述,本试验在松叶猪毛菜植株中建立了一种快速基因功能验证方法,为以后研究松叶猪毛菜功能基因奠定了基础。

submitted time 2020-12-17 From cooperative journals:《干旱区研究》 Hits631Downloads399 Comment 0

2. chinaXiv:201906.00092 [pdf]

植物原生质体在分子细胞生物学研究中的应用

肖政; 徐艳琴; 罗念; 周银
Subjects: Biology >> Botany >> Applied botany

植物原生质体是去除了细胞壁的裸露细胞,其具有细胞全能性,现在广泛应用于植物分子细胞生物学的研究中,可以大大缩减实验周期,并有助于得到体内实验的实时检测数据。该文除了介绍植物原生质体的提取和纯化方法外,还对国内外利用各种植物的原生质体进行细胞瞬时转化、亚细胞定位、细胞融合和大分子复合物相互作用等试验进行了总结和讨论。植物原生质体还可用于基因表达模式的实时监测,并作为生物反应器的受体细胞进行代谢物的体外生产。此外,当前该技术所面临的瓶颈也进行了分析,为植物原生质体在分子细胞生物学领域的应用提供帮助,为技术的优化和推广提供参考。

submitted time 2019-06-17 From cooperative journals:《广西植物》 Hits844Downloads493 Comment 0

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