分类： 生物学 >> 病毒学 提交时间： 2020-02-14
摘要： 摘要：2019年12月，中国武汉报道了2019新型冠状病毒（2019 novel Coronavirus，2019-nCoV）引起的肺炎。基于基因组信息，我们前期研究结果显示2019-nCoV与SARS冠状病毒虽然同属于Beta冠状病毒B亚群（BB冠状病毒），但两种病毒差异很大，这一结果与两者临床症状差异一致。前期研究还发现了BB冠状病毒存在大量的可变翻译，并从分子水平揭示了BB冠状病毒变异快、多样性高的特点。本研究在国际上首次报道BB冠状病毒S蛋白上的一个重要突变，这个突变使2019-nCoV具有了一个可供Furin蛋白酶切的位点，是除鼠肝炎冠状病毒外所有的其它BB冠状病毒（包括SARS和SARS样（SARS-like）冠状病毒）所不具有的。这个突变有可能增强了2019-nCoV侵染细胞的效率，进而使其传播力显著大于SARS冠状病毒。由于这个突变，2019冠状病毒的包装机制也会不同于SARS等其它大部分Beta冠状病毒，而有可能与鼠肝炎冠状病毒、HIV、埃博拉病毒和一些禽流感病毒的包装机制相同。作为一个意外发现，一些禽流感病毒也可以通过突变获得Furin蛋白酶切位点。对这个重要突变的后续研究将为揭示2019-nCoV传播力强的原因，以及为药物、抗体和疫苗的开发等工作奠定基础。
分类： 农、林、牧、渔 >> 畜牧、兽医科学 提交时间： 2023-06-11
摘要： 新型禽流感病毒对家禽养殖业可造成严重经济损失，及时发现和阻断其传播具有重要意义。2022-2023年，本实验室在我国华东、华北地区发病鸡群中监测到新型H3N3亚型禽流感病毒的出现和传播。本研究对发病鸡群开展了临床发病情况调查，对分离病毒进行了全基因组演化分析，并对分离的代表性病毒进行了鸡致病性以及空气传播性实验。结果表明：1）H3N3最早于2022年12月在华东地区发生产蛋下降的蛋鸡群出现，随后陆续在华东、华北、东北等多个地区的鸡群中监测到，发病群体主要为产蛋鸡，鸡群发病率高，死亡率低（1%-5%），主要引起产蛋率急性下降（10%-40%）；2）病毒全基因组序列分析显示：H3N3病毒为新型重排病毒，由鸡群中流行的H3N8病毒与H10N3病毒重排产生，6个内部基因来源于H9N2病毒；3）与H3N8病毒类似，新型H3N3病毒对鸡高度易感，可在鸡呼吸系统高效复制、排毒，引起呼吸系统严重病理损伤；4）空气传播性实验表明，H3N8病毒不能在鸡之间有效空气传播，而新型H3N3病毒能够在鸡之间有效空气传播。综上，新型H3N3禽流感病毒对鸡具有较强的致病性、传播性，有可能成为新的优势流行病毒，对我国家禽养殖业威胁较大，需要开展其防控研究。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-04-19 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 鸡卵清蛋白（Ovalbumin，OV）基因5’调控序列是构建鸡输卵管生物反应器的首选调控元件。以EGFP为报告基因，构建OV启动子真核表达载体，转染原代输卵管上皮细胞和CHO细胞，筛选得到1.1kb的高效OV启动子。构建1.1kb OV启动子表达H5N1亚型禽流感病毒HA蛋白真核表达载体pOV1.1k-HA，转染CHO细胞。PCR、RT-PCR鉴定结果证明HA基因整合至CHO细胞基因组，并进行转录；SDS-PAGE、Western blot及HA试验结果证明HA蛋白在CHO细胞内的表达，并具有免疫反应性和血凝活性。以纯化的HA蛋白免疫4周龄SPF鸡，2周后加强免疫一次，加强免疫3周HI抗体水平为6.3log2；以106 EID50 H5N1(A/Goose/Guangdong/1/96)亚型禽流感病毒鼻腔接种SPF鸡，免疫组100%存活，无排毒现象，对照组100%死亡。结果表明：筛选的1.1kb OV启动子可有效驱动HA蛋白表达，表达的HA蛋白免疫SPF鸡对禽流感病毒攻击提供完全保护；为鸡输卵管生物反应器表达保护性抗原和珍贵药物蛋白奠定了基础。
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