异源表达AtCYSa基因烟草的耐盐和抗虫特性分析

分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-01-11 合作期刊: 《中国生物工程杂志》

姚民 朱淑华 李佛生 张士彦 唐琳

摘要： 植物半胱氨酸蛋白酶抑制剂在植物防御生物与非生物胁迫过程中发挥着重要的作用。拟南芥中的半胱氨酸蛋白酶抑制剂AtCYSa基因的表达能够受到多种胁迫的诱导，且在拟南芥中过量表达AtCYSa基因可以增强转基因拟南芥抵御盐、干旱和氧化等非生物胁迫的能力。为了进一步探究AtCYSa基因的功能以及在烟草中的应用，构建了植物表达载体pCAMBIA 1302-AtCYSa。通过PCR以及RT-PCR验证共获得4株阳性转基因烟草，选择其中3株转基因烟草进行盐胁迫处理和抗虫活性实验。在盐胁迫处理中，100mM NaCl和200mM NaCl处理组的丙二醛含量显著低于野生型对照组。伊文思蓝染色和细胞相对活性结果表明，转基因烟草的细胞活性比野生型烟草明显偏高。这说明在盐胁迫处理下，AtCYSa基因的表达能够起到保护转基因烟草的作用。抗虫活性研究发现，实验组的幼虫总重均呈明显的下降趋势，且幼虫死亡率显著高于对照组。这些结果表明，AtCYSa基因在烟草中的过量表达能够增强转基因烟草的耐盐以及抗虫的能力。

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