摘要【目的】对美洲大蠊内生粘质沙雷氏菌几丁质酶ChiA基因进行克隆、可溶性表达及功能验证。【方法】PCR扩增ChiA基因,TA亚克隆,构建重组表达载体ChiA/pET21b,生物信息学分析和低温诱导表达、SDS-PAGE、Western-Blot鉴定,打孔法对几丁质酶活性检测。【结果】PCR成功扩增了ChiA基因序列,该序列与Gen Bank上的S.marcescens ChiA基因序列同源性达99%;该序列编码571个氨基酸,并能够在原核系统中稳定表达。可溶性表达分析显示:通过低温诱导表达,获得可溶性的目的蛋白;活性试验发现:含目的蛋白的表达产物可分解几丁质,且活性强于美洲大蠊内生粘质沙雷氏菌。【结论】从美洲大蠊内生粘质沙雷氏菌基因组中成功克隆了几丁质酶ChiA基因,通过原核表达系统获得了具有较强活性的可溶性几丁质酶ChiA,为其应用奠定了基础。 |
submitted time 2018-11-08 From cooperative journals:《中国生物工程杂志》 Hits2725, Downloads820, Comment 0
针对遥感云服务平台中不可信用户的入侵现象,结合遥感云用户行为特点和贝叶斯网络算法设计了一种用户行为认证方案。该方案论述了遥感云平台用户的行为认证机制,并且根据用户行为特点建立了用户行为认证集,结合贝叶斯网络算法预测特点和用户行为属性建立了用于认证等级预测的贝叶斯网络模型,把该模型中分析得出的用户行为属性的权重信息应用到用户等级预测算法中,使该算法针对遥感云用户认证更安全准确,从而实现对用户行为认证等级的预测。仿真实例表明该方法能够准确识别出不可信用户,有效保证遥感云服务平台的安全性。 |
submitted time 2018-05-20 From cooperative journals:《计算机应用研究》 Hits1077, Downloads668, Comment 0