分类： 生物学 >> 生物化学 提交时间： 2022-03-09
摘要： 尿液中的蛋白质是经过肾小球多次过滤血浆后富集起来的，其中的信息能较敏感的反映人体的变化。人们接种疫苗后，血液中抗体滴度以及阳转率检验一般在2~4周进行，那么尿液是否可以更早的观察到人体免疫反应的开始或者进程呢？接种同样的疫苗之后，不同人的自身免疫反应是否一致呢？我们招聘了8名志愿者（4女，4男）接种当年的四价流感病毒裂解疫苗。疫苗使用世界卫生组织（WHO）推荐的甲型和乙型流行性感冒病毒株，分别接种鸡胚，经培养、收获病毒液、灭活、浓缩、纯化、裂解后制成。该疫苗在进行临床试验后验证具有抗体保护，即接种本疫苗后，可刺激机体产生抗流感病毒的免疫力。我们发现每个人接种疫苗后的免疫反应不尽相同，尿液中和免疫反应有关的差异蛋白最早出现在接种后24h尿样中。
分类： 生物学 >> 生物化学 提交时间： 2020-06-15
摘要： 健康人尿液中的蛋白质含量虽较低，但种类却十分丰富，尿蛋白质组所蕴含信息能够展现机体生理与病理早期阶段时的细微差别。蛋白质的化学修饰是指其氨基酸残基或其链末端上参与的共价基团反应，进而使其分子的结构、执行的调控和信息传递的功能得到改变，因此，对尿液蛋白质化学修饰水平的比较与研究同样有重要意义。本研究拟以不同年龄段健康人群的尿液（儿童22例，年轻人10例，老年人6例）为研究对象，通过高分辨串联质谱及非标记定量的蛋白质组学分析方法，结合非限制性修饰鉴定算法整体比较三种类型样品之间的蛋白质化学修饰差异水平。结果表明，涉及多种氨基酸残基的氧化修饰是老年人与青少年尿液蛋白质样品之间的主要差异，且修饰影响了众多蛋白质的生物过程。本研究首次利用非限制性修饰鉴定算法研究了不同年龄段人群的尿液在整体蛋白质组修饰上的差异，并指出了氧化修饰是区分青少年和老年人尿液蛋白质的主要修饰类型。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-01-15 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 【背景】对虾白斑综合征病毒(White Spot Syndrome Virus ,WSSV)是对虾养殖业中危害最严重的病毒之一，至今尚无规模应用的有效药物防治方法。但近年来在WSSV免疫防治上进展较大。Vp28蛋白是WSSV囊膜上的主要结构蛋白，2004年以来其编码基因已在8种宿主中表达成功，在实验室试验中对WSSV的防治疗效显著，但目前尚未见到其在对虾产业中的应用。【目的】利用对虾的天然饵料聚球藻表达Vp28重组蛋白，这种药食同源可简化操作，降低成本，有助其在生产中应用。【方法】用荧光定量PCR方法检测转vp28基因聚球藻7942中vp28基因的表达效率。通过氧电极的方法测得转vp28基因型聚球藻在不同温度、光照、pH和盐度下的光合活性变化，找到它的最适生长条件。【结果】检测了vp28基因表达效率为9.52％，是在鱼腥藻7120表达效率的三倍。最适采收时间是对数生长后期（15d左右）。转基因型蓝藻7942的最适生长条件是：温度为40 ℃，盐度为0-0.1 mol Nacl /L，pH为7.5，光强450 μmol·m-2·s-1。【结论】本研究确定了vp28基因在聚球藻中的表达效率及该转基因藻的最适培养条件，这些研究结果为用转vp28基因型聚球藻7942规模制备药食同源的口服剂提供了依据。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-07-24 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 本研究首次发现达托霉素是一种新的胰蛋白酶激活剂。当胰蛋白酶与达托霉素的物质的量的比在反应时达到34.05时，达托霉素对胰蛋白酶比活力的激活率平均达到32.92 %。通过计算机模拟技术对达托霉素与胰蛋白酶以及达托霉素对胰蛋白酶底物复合物分别进行分子对接，发现达托霉素与胰蛋白酶的活性中心位置很靠近，达托霉素链状中的天冬氨酸的R基与酶活性中心的组氨酸-57发生了氢键相互作用，推测达托霉素使酶和底物复合物结构更加稳定，从而有利于催化作用。利用等温滴定量热法（Isothermal titration calorimetry，ITC）验证模拟结果，表明胰蛋白酶上具有1 个达托霉素结合位点，解离常数Kd为17.83 μM，摩尔结合焓△H为237.9±28.17 cal·mol-1，摩尔结合熵△S为22.5 cal·mol-1·deg-1。这些结果从热力学角度支持了分子对接结果。本研究发现达托霉素除具有抗革兰氏阳性耐药性细菌的功能外，还能促进胰蛋白酶比活这一新的功能，是一种新的胰蛋白酶激活剂。
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