• 腺病毒介导靶向NF-kB基因的shRNA对体外食蟹猴子宫内膜细胞增殖活性的影响

    分类: 医学、药学 >> 基础医学 提交时间: 2017-12-07 合作期刊: 《南方医科大学学报》

    摘要: 目的合成高特异性靶向NF-kB基因的shRNA腺病毒载体,观察其对体外培养的食蟹猴子宫内膜细胞的增殖活动是否具有直接的抑制效应。方法设计携带有NF-kB-p65基因及空载基因的shRNA腺病毒载体,体外培养食蟹猴子宫内膜细胞,分成实验组及对照组,实验组转染携带NF-kB-p65 shRNA的腺病毒,对照组转染携带空载基因的腺病毒,共培养后观察有关细胞增殖活性如凋亡蛋白及细胞周期的改变情况。结果腺病毒载体PCR和测序结果与预期结果一致,经包装产生的病毒滴度为1.58x1011U/ml} NF-kB-p65-shRNA腺病毒感染食蟹猴子宫内膜细胞后,实验组子宫内膜细胞凋亡蛋白的表达水平明显高于阴性对照组(P<0.05 );实验组凋亡细胞较对照组明显增多,进人细胞分裂期细胞数明显少于对照组(P<0.05 )。结论携带NF-kB基因的腺病毒体外感染食蟹猴子宫内膜细胞后可加速子宫内膜细胞的凋亡,并抑制子宫内膜细胞的增殖,为后期该基因在食蟹猴子宫内膜异位症模型上的研究提供理论基础。

  • 慢病毒介导靶向survivin基因的shRNA抑制子宫内膜在裸鼠腹腔种植生长

    分类: 医学、药学 >> 基础医学 提交时间: 2017-12-07 合作期刊: 《南方医科大学学报》

    摘要: 目的研究慢病毒介导生存素(survivin)基因特异性短发夹状RNA(shRNA)对人子宫内膜在裸鼠腹腔种植生长的影响方法将45只裸鼠随机分为实验组、阴性对照组及空白对照组,每组15只,将子宫内膜异位症患者在位内膜注射入裸鼠腹腔,同时将survivin-shRNA慢病毒、空载慢病毒及磷酸盐缓冲液分别注射至3组裸鼠腹腔内,2周后观察各组子宫内膜种植成功率,光镜下观察异位病灶的形态学特点,免疫组化方法检测各组病灶中survivin的表达水平。结果实验组子宫内膜种植成功率26.6'7%)明显低于阴性对照组(73.33%)及空白对照组(80% , P<0.01);实验组成活的异位内膜腺体发育不良,间质伴有不同程度的坏死;该组病灶中survivin蛋白表达亦明显下降,与两对照组比较差异有显著性((P<0.001)。结论慢病毒介导survivin基因特异性shRNA能够通过靶向沉默survivin基因明显抑制人子宫内膜在裸鼠腹腔中的种植生长。