不同冻存条件对甘蔗原生质体活力和再生能力的影响

分类： 生物学 >> 植物学 >> 植物学研究、实验与植物演化、发展 提交时间： 2018-06-25 合作期刊: 《广西植物》

李素丽 宋亚妮 李志刚 刘芳君 赖沛衡 覃潇怡 李嘉俊

摘要： 为了获得活力高和再生能力强的甘蔗原生质体，本研究对甘蔗原生质体的冻存液浓度、冻存温度和冻存部位进行研究，结果发现：（1）不同的冻存液、不同的冻存温度和不同的取材部位原生质体冻存后复苏对甘蔗原生质体的活力影响有显著差异性，三个冻存液组合比较，在组合2（70%培养基+20%血清+10% DMSO），冻存30 d后复苏活力最强，高达72%；冻存90 d内复苏，-196℃液氮和-80℃冰箱冻存，甘蔗原生质体的活力差异不显著，活力均达75%以上，但90 d冻存后复苏，-196℃液氮冻存后复苏比-80 ℃冰箱冻存冻存后复苏原生质活力强；不同取材部位比较，幼叶冻存30 d后复苏所得原生质体活力较高达79.2%，茎尖冻存30 d后复苏所得原生质体活力仅为42.7%；（2）不同的冻存液和不同的冻存温度，细胞第一次启动分裂和形成细胞团的时间差异不显著，一般培养5~6 d，细胞壁基本形成完整，培养6 d后，细胞启动分裂，培养15 d后形成细胞团。不同的材料部位相比较，茎尖酶解所得原生质体再生能力最强，较幼叶酶解原生质体，形成细胞壁的时间早3 d，第一次分裂时间早2 d。研究结果将为甘蔗原生质体的超低温保存提供科学依据，为体细胞融合育种、遗传学和转基因研究提供材料和技术支撑。

 点击量 7341  下载量 2626  评论