分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-11-26 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 目的：E蛋白（Protein E, PE）是不可分型流感嗜血杆菌（Nontypeable Haemophilus influenza, NTHi）表面的一种纤溶酶原（Plasminogen, Plg）受体，其C末端含有两个赖氨酸残基。NTHi可通过其表面的PE与Plg结合，从而利用机体的纤溶系统深层入侵宿主。基于脂蛋白（a）[Lipoprotein(a), Lp(a)]中载脂蛋白（a）[Apolipoprotein(a), Apo(a)]与Plg高度的同源性，本研究拟证明Lp(a)是否会与重组表达的PE（rPE）结合。方法：原核表达并纯化rPE及敲除C末端两个赖氨酸残基的rPEΔKK，密度梯度离心结合阴离子交换层析分离人血浆Lp(a)，通过ELISA、Pull down、Western blot等方法研究rPE与Lp(a)的相互作用。结果：rPE与Lp(a)结合，但不与LDL结合，且rPEΔKK与Lp(a)的结合能力明显低于rPE；赖氨酸类似物6-氨基乙酸（EACA）能有效抑制rPE与Lp(a)的结合；Lp(a)对rPE与Plg的结合具有微弱的抑制作用。结论：rPE能够与Lp(a)结合，其中rPE的C末端赖氨酸残基和Apo(a)的赖氨酸结合位点（Lysine binding sites, LBS）是rPE与Lp(a)结合的主要位点
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-11-26 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 目的：E蛋白（Protein E, PE）是不可分型流感嗜血杆菌（Nontypeable Haemophilus influenza, NTHi）表面的一种纤溶酶原（Plasminogen, Plg）受体，其C末端含有两个赖氨酸残基。NTHi可通过其表面的PE与Plg结合，从而利用机体的纤溶系统深层入侵宿主。基于脂蛋白（a）[Lipoprotein(a), Lp(a)]中载脂蛋白（a）[Apolipoprotein(a), Apo(a)]与Plg高度的同源性，本研究拟证明Lp(a)是否会与重组表达的PE（rPE）结合。方法：原核表达并纯化rPE及敲除C末端两个赖氨酸残基的rPEΔKK，密度梯度离心结合阴离子交换层析分离人血浆Lp(a)，通过ELISA、Pull down、Western blot等方法研究rPE与Lp(a)的相互作用。结果：rPE与Lp(a)结合，但不与LDL结合，且rPEΔKK与Lp(a)的结合能力明显低于rPE；赖氨酸类似物6-氨基乙酸（EACA）能有效抑制rPE与Lp(a)的结合；Lp(a)对rPE与Plg的结合具有微弱的抑制作用。结论：rPE能够与Lp(a)结合，其中rPE的C末端赖氨酸残基和Apo(a)的赖氨酸结合位点（Lysine binding sites, LBS）是rPE与Lp(a)结合的主要位点
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-11-13 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： ）[Lipoprotein(a), Lp(a)]中载脂蛋白（a）[Apolipoprotein(a), Apo(a)]与Plg高度的同源性，本研究拟证明Lp(a)是否会与重组表达的PE（rPE）结合。方法：原核表达并纯化rPE及敲除C末端两个赖氨酸残基的rPEΔKK，密度梯度离心结合阴离子交换层析分离人血浆Lp(a)，通过ELISA、Pull down、Western blot等方法研究rPE与Lp(a)的相互作用。结果：rPE与Lp(a)结合，但不与LDL结合，且rPEΔKK与Lp(a)的结合能力明显低于rPE；赖氨酸类似物6-氨基乙酸（EACA）能有效抑制rPE与Lp(a)的结合；Lp(a)对rPE与Plg的结合具有微弱的抑制作用。结论：rPE能够与Lp(a)结合，其中rPE的C末端赖氨酸残基和Apo(a)的赖氨酸结合位点（Lysine binding sites, LBS）是rPE与Lp(a)结合的主要位点。
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