分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-11-21 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 为了延长重组睫状神经营养因子在体内的保留半衰期，基于CNTF中天然的游离半胱氨酸残基，前期工作中我们采用聚乙二醇修饰和转铁蛋白偶联的两种方式对CNTF进行改造。本研究中我们采用常规分析手段对PEG20k-CNTF和Tf-PEG5k-CNTF进行对比表征。高效凝胶过滤和动态光散射分析结果显示两者拥有相近的表观分子体积。细胞试验结果显示两种耦合物的活性分别下降至未修饰CNTF的50.6%和65.8%。抗体CNTF抗体亲和力结果显示PEG20k修饰后亲合力下降至原蛋白的3.8%，转铁蛋白偶联后保留89.9%原蛋白亲合力。药代动力学结果显示PEG20k-CNTF和Tf-PEG5k-CNTF在SD大鼠血液中的保留半衰期分别为5.34 ± 0.26和8.65 ± 0.60小时，与未修饰rhCNTF相比延长了约21.4倍和34.6倍。药效学结果显示在每周两次每次1.0 mg/kg （rhCNTF等量）的给药频率和剂量，PEG20k-CNTF比Tf-PEG5k-CNTF更显著地降低实验小鼠体重。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-11-21 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 为了解除微生物发酵生产丙酸过程中代谢产物（丙酸）对菌体生长的抑制作用，以实验室保藏的产酸丙酸杆菌（耐30g/L丙酸）为出发菌株P-0，通过丙酸压力筛选获得了一株耐10g/L丙酸的产酸性能良好的菌株P-10，降低了发酵过程中丙酸对菌体生长的抑制作用。菌株P-10做摇瓶发酵，发酵周期168h，丙酸浓度为49.66 g/L，产酸速率为0.30g/L·h，较出发菌株P-0提高了53.04%；7L发酵罐实验表明，菌株P-10发酵周期168h，丙酸浓度为55.63g/L，产酸速率0.33g/L·h。同时对菌株P-10做二次接种实验，结果表明，84h为二次接种最适时间段，且84h进行二次接种时，丙酸浓度提高了17.77%，二次接种实验不但有利于有机酸的积累，而且可以提高菌株的产酸能力和耐酸能力；经过选育的菌株P-10具有优良的产酸稳定性，有利于菌种的工业化生产和应用，同时对后续的发酵分离耦合具有重要意义。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-11-21 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 为了延长重组睫状神经营养因子在体内的保留半衰期，基于CNTF中天然的游离半胱氨酸残基，前期工作中我们采用聚乙二醇修饰和转铁蛋白偶联的两种方式对CNTF进行改造。本研究中我们采用常规分析手段对PEG20k-CNTF和Tf-PEG5k-CNTF进行对比表征。高效凝胶过滤和动态光散射分析结果显示两者拥有相近的表观分子体积。细胞试验结果显示两种耦合物的活性分别下降至未修饰CNTF的50.6%和65.8%。抗体CNTF抗体亲和力结果显示PEG20k修饰后亲合力下降至原蛋白的3.8%，转铁蛋白偶联后保留89.9%原蛋白亲合力。药代动力学结果显示PEG20k-CNTF和Tf-PEG5k-CNTF在SD大鼠血液中的保留半衰期分别为5.34 ± 0.26和8.65 ± 0.60小时，与未修饰rhCNTF相比延长了约21.4倍和34.6倍。药效学结果显示在每周两次每次1.0 mg/kg （rhCNTF等量）的给药频率和剂量，PEG20k-CNTF比Tf-PEG5k-CNTF更显著地降低实验小鼠体重。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-11-21 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 为了解除微生物发酵生产丙酸过程中代谢产物（丙酸）对菌体生长的抑制作用，以实验室保藏的产酸丙酸杆菌（耐30g/L丙酸）为出发菌株P-0，通过丙酸压力筛选获得了一株耐10g/L丙酸的产酸性能良好的菌株P-10，降低了发酵过程中丙酸对菌体生长的抑制作用。菌株P-10做摇瓶发酵，发酵周期168h，丙酸浓度为49.66 g/L，产酸速率为0.30g/L·h，较出发菌株P-0提高了53.04%；7L发酵罐实验表明，菌株P-10发酵周期168h，丙酸浓度为55.63g/L，产酸速率0.33g/L·h。同时对菌株P-10做二次接种实验，结果表明，84h为二次接种最适时间段，且84h进行二次接种时，丙酸浓度提高了17.77%，二次接种实验不但有利于有机酸的积累，而且可以提高菌株的产酸能力和耐酸能力；经过选育的菌株P-10具有优良的产酸稳定性，有利于菌种的工业化生产和应用，同时对后续的发酵分离耦合具有重要意义。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-09-20
摘要： 层析技术在生物分离纯化领域占有非常重要的地位。作为该技术主要组成部分，层析介质的结构与性能极大地影响最终分离纯化效果。其中，载量是决定介质分离纯化能力的重要性质，如何提高介质载量是生物分离工程领域一直关注的重点。本论文以高载量琼脂糖层析介质为目标，分别开展了琼脂糖疏水层析介质和金属螯合层析介质的tailor-made研究。对于琼脂糖疏水层析介质，引入不同长度间臂，实现疏水性质可控制备，并用于CHO细胞表达乙肝表面抗原纯化，该方法能显著提高介质对疫苗的结合量，疫苗活性回收率达90%以上，纯化倍数65.8，均优于传统疏水介质。对于琼脂糖金属螯合介质，通过采取接枝葡聚糖策略，同时调控接枝程度，实现葡聚糖接枝可控制备。这种接枝型金属螯合介质对组氨酸标记重组蛋白的载量较传统介质提升1.5倍以上，远优于传统介质。Tailor-made型高载量层析介质在重组蛋白大规模分离纯化领域前景广阔。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-07-24 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 为了解除微生物发酵生产丙酸过程中代谢产物（丙酸）对菌体生长的抑制作用，以实验室保藏的产酸丙酸杆菌（耐30g/L丙酸）为出发菌株P-0，通过丙酸压力筛选获得了一株耐10g/L丙酸的产酸性能良好的菌株P-10，降低了发酵过程中丙酸对菌体生长的抑制作用。菌株P-10做摇瓶发酵，发酵周期168h，丙酸浓度为49.66 g/L，产酸速率为0.30g/L·h，较出发菌株P-0提高了53.04%；7L发酵罐实验表明，菌株P-10发酵周期168h，丙酸浓度为55.63g/L，产酸速率0.33g/L·h。同时对菌株P-10做二次接种实验，结果表明，84h为二次接种最适时间段，且84h进行二次接种时，丙酸浓度提高了17.77%，二次接种实验不但有利于有机酸的积累，而且可以提高菌株的产酸能力和耐酸能力；经过选育的菌株P-10具有优良的产酸稳定性，有利于菌种的工业化生产和应用，同时对后续的发酵分离耦合具有重要意义。
点击量
点击量
下载量
评论
