L-茶氨酸对过氧化氢诱导山羊瘤胃上皮细胞凋亡的保护作用

分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2018-12-24 合作期刊: 《动物营养学报》

孔志伟 揭红东 陈亮 任傲 周传社 谭支良

摘要： 本试验旨在研究L-茶氨酸对过氧化氢（H2O2）诱导山羊瘤胃上皮细胞凋亡的保护作用。采集42日龄的湘东黑山羊的瘤胃组织进行原代细胞分离、培养、纯化。对照组采用完全培养基，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别在完全培养基中添加800 µmol/L H2O2、4 mmol/L L-茶氨酸+800 µmol/L H2O2、8 mmol/L L-茶氨酸+800 µmol/L H2O2和16 mmol/L L-茶氨酸+800 µmol/L H2O2，每组3个重复。培养12 h后，采用噻唑蓝（MTT）法检测细胞存活率，采用流式细胞术检测细胞周期，采用实时定量PCR法和蛋白质印迹（Western blot）法检测Bax和Bcl-2基因及其蛋白的表达。结果表明：L-茶氨酸能显著提高H2O2损伤的瘤胃上皮细胞存活率（P<0.05），显著增加S期细胞比例（P<0.05），显著降低Bax基因和蛋白表达量（P<0.05），显著提高Bcl-2基因和蛋白表达量（P<0.05），显著提高Bcl-2和Bax基因和蛋白表达量的比值（P<0.05）。结果提示，L-茶氨酸能通过抑制细胞凋亡来有效地保护由H2O2导致的瘤胃上皮细胞损伤；体外条件下，培养液中添加的L-茶氨酸浓度高于8 mm/L时能有效发挥抗凋亡作用。

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