分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2017-12-07 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要： 目的探讨RNA干扰沉默IgG表达对人前列腺癌PC3细胞株放射敏感性的影响。方法将IgG FC段受体RNA质粒(FCGR1AshRNA)和阴性对照质粒(NCshRNA)转染人前列腺癌PC3细胞，Q-PCR和Western-blot检测IgG表达。以60Coγ射线0,2,4,6,8,10 Gy分别照射空白对照组、NCshRNA组、FCGR 1 AshRNA组细胞;照射48 h后，MTS法检测细胞增殖状态;照射12,24,48 h后，流式细胞术检测细胞凋亡率。重点探讨6Gy射线照射后不同时间的敏感性、增值率、抑制率与凋亡率。结果质粒转染前列腺癌PC3细胞后，FCGR1AshRNA与NCshRNA组和空白对照组相比，IgG表达水平明显下降，细胞增殖受抑制(P<0.05 )。不同放射剂量下48 h后及6Gy射线照射后的不同时间段，FCGR 1 AshRNA组的增值率减低，凋亡率升高(P<0.05 )。结论RNA干扰抑制IgG表达能提高PC3细胞对放射线的敏感性，IgG基因可能是联合放疗治疗前列腺癌的理想靶点。
分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2017-12-07 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要： 目的 探讨稳定低表达DNA甲基转移酶3b（DNMT3b）基因对人膀胱癌细胞生长和凋亡的影响。方法 包装表达DNMT3b siRNA和阴性对照siRNA的慢病毒，通过慢病毒感染的方法获得稳定低表达DNMT3b的膀胱癌细胞BIU-87及对照细胞。MTT和流式细胞仪检测DNMT3b稳定低表达对细胞增殖和凋亡的影响；体内裸鼠成瘤实验观察DNMT3b稳定低表达对肿瘤的抑制效果；荧光定量PCR和Western blot检测DNMT3b稳定低表达对细胞生长和凋亡相关基因表达的影响；甲基化特异性PCR检测对细胞生长和凋亡相关基因甲基化的影响。结果 荧光定量PCR和Western blot检测结果显示，DNMT3b mRNA和蛋白水平在BIU-87稳定细胞株中稳定低表达；DNMT3b稳定低表达可以抑制BIU-87细胞的生长，并且抑制裸鼠皮下瘤体的生长；DNMT3b稳定低表达可以促进BIU-87细胞的凋亡；DNMT3b稳定低表达可以增加凋亡及细胞生长相关基因DAPK，Bax和RASSF1A mRNA和蛋白水平的表达；DNMT3b稳定低表达可以减少凋亡及细胞生长相关基因DAPK，Bax和RASSF1A启动子区域的甲基化水平。结论 DNMT3b稳定低表达可能通过调控凋亡相关基因以及细胞生长相关基因启动子区域的甲基化水平来影响基因的表达，从而抑制BIU-87细胞的生长，诱导细胞凋亡。
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