Herpud1对后肾间充质细胞的作用及其机制的探讨

分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-01-11 合作期刊: 《中国生物工程杂志》

李依蔓 周钦

摘要： 为初步探讨Herpud1在肾脏发育中的生物学作用，过表达Herpud1载体及敲低Herpud1载体被构建。载体被转染进后肾间充质细胞，通过RT-PCR和蛋白免疫印迹检测了上皮间质的转换过程(EMT)的标志蛋白E-钙粘蛋白(E-cadherin)，波形蛋白(Vimentin)，Snail蛋白及内质网应力的标志蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78），真核起始因子2α (eIF2α）的表达变化，通过EDU细胞增殖实验检测了Herpud1对细胞的增殖的作用，同时利用细胞划痕实验验证了细胞的迁移能力。结果显示，与空白对照组相比，在Herpud1过表达的实验组中，E-cadherin的表达在mRNA和蛋白水平均是降低的，而Snail和Vimentin的表达则是上升的，并伴随着细胞增殖活性的降低和细胞迁移能力增加，同时内质网应力相关蛋白GRP78和eIF2α是升高的。在Herpud1敲低的实验组，E-cadherin的表达在mRNA和蛋白水平均是升高的，而Snail和Vimentin的表达下降，细胞迁移能力是降低并且细胞增殖活性是升高的，同时内质网应力相关蛋白GRP78和eIF2α也是降低的。这些结果证明了Herpud1可以促进MK3细胞EMT过程，提高细胞的迁移能力，抑制细胞的增殖活性，其机制可能与细胞的内质网应力相关。

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