体外苏氨酸循环固碳途径的构建

分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-06-01 合作期刊: 《中国生物工程杂志》

巨晓芝 袁倩倩 马春玲 肖冬光 马红武

摘要： 乙酰CoA是生物体代谢过程中重要的代谢物，也是许多有价值产品合成的前体物质。然而传统途径中通过丙酮酸脱羧生成乙酰CoA碳得率较低，因此构建一条高效的乙酰CoA合成途径具有重要的意义。本研究试图体外验证文献报道的高碳摩尔得率合成乙酰CoA的苏氨酸循环固碳途径，有较重要的理论意义和应用价值。本研究在体外构建了苏氨酸循环固碳途径合成乙酰CoA，通过分段加酶的方式将其在体外进行了验证。在体外验证时，以丙酮酸为底物，则丝氨酸脱氨酶（TdcB）为循环途径的最后一步反应。结果表明，当加入途径中除丝氨酸脱氨酶之外的酶时，测得的乙酰CoA浓度约1.5mmol/L，待反应达到平衡时，加入丝氨酸脱氨酶，丝氨酸转化为丙酮酸，丙酮酸再次进入循环，乙酰CoA的量增加了约0.2mmol/L，由此得出结论在体外苏氨酸循环实现了固碳。

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