分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-11-21 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 目的：热带假丝酵母以油脂为底物发酵时会产生副产物甘油，本研究对热带假丝酵母gk基因进行过表达，将副产物甘油转化为能量，提高油脂转化利用效率。方法：本研究以热带假丝酵母Candida tropicalis 1798中的甘油激酶（gk）为研究对象，利用PCR技术获得同源臂基因gkpR，通过一步法无缝克隆将同源臂和G418抗性基因(kanr)连接至pPICzαA载体，同时将解脂假丝酵母Candida lipolytica 1457中的启动子基因pGAP无缝连接至载体中的gkpR，构成质粒pPICzαA-gkp，并电转化至C.tropicalis 1798感受态细胞中，通过一次同源单交换，将启动子pGK替换为pGAP。结果：经过G418抗性筛选和PCR鉴定，成功获得pGAP基因替换菌株C. tropicalis 1798-gkPr；发酵验证结果显示，启动子基因替换C. tropicalis 1798在以甘油为底物培养时重组菌OD600 值比野生型菌株高46.4%，重组菌培养基中甘油剩余量比野生菌降低56.1%，表明启动子替换能促进C. tropicalis 1798对甘油吸收利用。此外，以油脂为底物进行发酵实验时还发现重组菌产长链二元酸的量比野生菌提高32.7%。结论：通过启动子替换手段构建的重组菌C. tropicalis 1798-gkPr，提高了热带假丝酵母对于油脂组分中甘油成分的利用效率。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-11-21 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 目的：热带假丝酵母以油脂为底物发酵时会产生副产物甘油，本研究对热带假丝酵母gk基因进行过表达，将副产物甘油转化为能量，提高油脂转化利用效率。方法：本研究以热带假丝酵母Candida tropicalis 1798中的甘油激酶（gk）为研究对象，利用PCR技术获得同源臂基因gkpR，通过一步法无缝克隆将同源臂和G418抗性基因(kanr)连接至pPICzαA载体，同时将解脂假丝酵母Candida lipolytica 1457中的启动子基因pGAP无缝连接至载体中的gkpR，构成质粒pPICzαA-gkp，并电转化至C.tropicalis 1798感受态细胞中，通过一次同源单交换，将启动子pGK替换为pGAP。结果：经过G418抗性筛选和PCR鉴定，成功获得pGAP基因替换菌株C. tropicalis 1798-gkPr；发酵验证结果显示，启动子基因替换C. tropicalis 1798在以甘油为底物培养时重组菌OD600 值比野生型菌株高46.4%，重组菌培养基中甘油剩余量比野生菌降低56.1%，表明启动子替换能促进C. tropicalis 1798对甘油吸收利用。此外，以油脂为底物进行发酵实验时还发现重组菌产长链二元酸的量比野生菌提高32.7%。结论：通过启动子替换手段构建的重组菌C. tropicalis 1798-gkPr，提高了热带假丝酵母对于油脂组分中甘油成分的利用效率。
分类： 农、林、牧、渔 >> 农业基础学科 提交时间： 2017-11-06 合作期刊: 《中国生态农业学报》
摘要： 研究气候变化情景下豫北地区农业需灌水次数的变化情况, 可为当地灌溉以及保证农业可持续发展 提供参考。本文分析处理近63 a(1951—2013 年)气象数据和新乡七里营站点土壤数据, 结合作物生长参数, 利用降水、灌溉、作物蒸散发与土壤水分之间变化关系, 建立干旱灌水指数模型。此模型中干旱灌水指数(DII)分布在[-1, 1]之间, 小于0 时即干旱需灌水。在现有冬小麦-夏玉米种植制度下, 利用干水指数模型计算多年需干旱灌水指数, 并进一步得到灌水次数。选择冬小麦生长季分别为湿润(1985—1986 年)、正常(2004—2005 年)、干旱(1983—1984 年)的3 个典型实际代表年度, 夏玉米生长季分别为湿润(2003 年)、正常(1993 年)、干旱(2009 年)的3 个典型实际代表年, 计算了不同代表年冬小麦、夏玉米作物需水情况。进一步算得到了冬小麦、夏玉米在典型湿润、正常、干旱3 个不同代表年的干旱灌水指数, 并进行了有无灌水的干旱情况分析。结果表明: 近63 a 冬小麦夏玉米系统每年需灌水2~7 次不等, 平均需灌水5.1 次。冬小麦和夏玉米湿润、正常、干旱3 个代表年蒸散发量(ETC)分别为489.4 mm、551.4 mm、481.7 mm 和466.1 mm、477.8 mm、529.3 mm。在无灌水条件下典型代表年内, 冬小麦、夏玉米都会遭遇不同程度干旱, 典型湿润、正常、干旱代表年冬小麦分别灌水2 次、3 次、4 次, 夏玉米分别需灌水1 次、2 次、3 次后, 基本可以消除干旱对其正常生长影响。综上, 通过干旱灌水指数来量化需灌溉次数是可行的。气候变化情景下, 近10 年(2003—2013 年)需灌水频次变化大, 年际间干旱事件频发, 更好的科学灌溉管理可减少干旱对作物的影响。
点击量
点击量
下载量
评论
