分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-11-07 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在建立单胃动物仿生消化系统模拟猪饲料原料消化后还原糖释放量的测定方法，为饲料养分生物学效价的评估提供参考。还原糖释放量与饲粮上样量的线性关系研究以玉米-豆粕型饲粮（75%玉米+25%豆粕）为研究对象，上样量设0.2、0.4、0.6、0.8和1.0 g 5个处理，每个处理4个重复，每个重复1根消化管；方法的重复性检验以玉米-豆粕饲粮、大麦、花生粕和米糠为研究对象，每个样品设3个批次，每个批次4个重复；方法的可加性检验设19个处理，其中处理1～7分别为玉米、大麦、高粱、大豆粕、花生粕、棉籽粕和米糠饲粮，处理8～19为2种或2种以上饲料原料按不同比例组合制备的12种饲粮，每个处理4个重复，每个重复1根消化管，在仿生消化系统中模拟猪消化后测定各处理的还原糖释放量。结果表明：饲粮上样量在0.2~0.8 g时，还原糖总释放量与上样量呈显著的线性关系（R2=0.999 2），还原糖相对释放量在559.56～582.70 mg/g DM变化，变异系数为1.66%，而上样量为1.0 g时，还原糖相对释放量比上样量为0.2～0.8 g时的平均值下降5.37%；3个批次的大麦、花生粕、米糠和玉米-豆粕饲粮的还原糖释放量的批内变异系数、批间变异系数和总变异系数均不大于1.68%，批间最大相对偏差分别为0.68%、1.50%、1.39%和0.29%；12种饲粮还原糖释放量的实测值显著高于计算值（P<0.05），而还原糖释放量的计算值与实测值的线性回归模型与y=x相重合（截距P=0.480 5；斜率P=0.514 1）。由此得出，当饲粮上样量在0.2～0.8 g时，上样量与还原糖释放量呈显著线性关系；仿生消化法测定饲料中还原糖释放量的重复性和可加性满足定量分析的基本要求。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-11 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在探讨固态酶制剂评估中酶的适宜提取液及固–液分离方法。采用4×3双因素完全随机设计，其中提取液分别为去离子水、乙酸–乙酸钠缓冲液（0.1 mol/L，pH 5.50）、磷酸盐缓冲液（0.05 mol/L，pH 6.00）和0.9%NaCl溶液；溶液提取后的固–液分离方法分别为不分离、3 000 r/min离心3 min和中速滤纸过滤。每个处理5个重复，每个重复设2个平行，测定各个处理下酶的活性，并考察提取液的类型对酶制剂产品（α–半乳糖苷酶除外）溶解离心后溶液中溶质及蛋白质含量的影响。结果表明，磷酸盐缓冲液溶解木聚糖酶后活性最高（P0.05），且均显著地高于去离子水（P0.05）。酶制剂溶解后的固–液分离方法对木聚糖酶的测定活性无显著性影响（P>0.05）；提取液离心或过滤后β–葡聚糖酶活性最高（P<0.05）；提取液离心后β–甘露聚糖酶活性最高（P<0.05）；而提取液不分离时α–半乳糖苷酶的活性最高（P<0.05）。提取液的种类和酶制剂溶解后的固–液分离方法对4种非淀粉多糖酶的测定活性有极显著的交互作用（P<0.01）。乙酸–乙酸钠缓冲液对木聚糖酶制剂的溶解度最大（P<0.05），去离子水和0.9%NaCl溶液均对β–葡聚糖酶及β–甘露聚糖酶制剂的溶解度最大（P<0.05）。然而，乙酸–乙酸钠缓冲液溶解木聚糖酶、β–葡聚糖酶、β–甘露聚糖酶后提取液中蛋白质的含量均最低（P<0.05）。上述结果表明，乙酸–乙酸钠缓冲液溶解4种固态酶制剂可以最有效地将酶蛋白提取出来，α–半乳糖苷酶提取后不宜固液分离，而其他3种酶的提取液适宜进行离心分离。
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