分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-08-29 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 目的：探究miR-196a-5p对小鼠前体脂肪细胞增殖、分化的影响及其潜在的分子机制。方法：①构建小鼠肥胖模型，RT-PCR检测脂肪组织中miR-196a-5p表达量；②鸡尾酒法诱导3T3-L1前脂肪细胞分化，RT-PCR检测分化过程中miR-196a-5p的表达变化；③合成miR-196a-5p mimics和inhibitors转染3T3-L1细胞，以CCK8、EdU试剂盒检测miR-196a-5p对3T3-L1前脂肪细胞增殖的影响作用；④运用油红O染色、甘油三酯测定评估miR-196a-5p对3T3-L1细胞分化的影响；⑤RT-PCR检测miR-196a-5p对前脂肪细胞增殖、分化相关基因的影响；⑥ 结合前人文献，运用生物信息软件、荧光素酶报告系统对miR-196a-5p调控脂肪细胞分化的靶基因进行筛选和验证。结果：①miR-196a-5p在肥胖小鼠脂肪组织中高表达，在3T3-L1前脂肪细胞分化过程中先升高后下降；②与阴性对照组相比，mimics转染抑制了3T3-L1细胞增殖，inhibitors转染促进了3T3-L1细胞增殖；③ 与阴性对照组相比，mimics组积累了大量油红着色的脂滴，甘油三酯含量增多；而inhibitors组的脂滴少而小，甘油三酯含量相对降低；④与阴性对照组相比，mimics转染抑制了增殖标志基因Cyclin D1、Cyclin E、CDK2和CDK4表达，促进了分化标志基因PPARγ、C/EBPα、LPL、aP2等的表达；inhibitors转染则表现出与mimics转染相反的作用；⑤miR-196a-5p可显著抑制野生型MAP4K3和MAPK1 3'UTR荧光素酶活性，而突变绑定位点可废除该抑制效应。结论：miR-196a-5p不仅可抑制3T3-L1前脂肪细胞增殖，还可促进其诱导分化、沉积脂滴；miR-196a-5p可能通过靶向调节MAP4K3和MAPK1来介导3T3-L1前脂肪细胞分化。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-08-13 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 端粒是染色体末端的特殊结构，对染色体具有保护作用，并且和衰老及很多疾病相关。长链非编码RNA是长度大于200bp且一般不具有编码功能的RNA。TERRA（telomeric repeat-containing RNA）是由端粒重复序列转录的一类长链非编码RNA，研究表明TERRA具有参与调控端粒长度，促进异染色体形成和保护染色体末端等功能，并且TERRA的表达与疾病和衰老相关。由于TERRA对于端粒具有重要作用，因此对于TERRA的研究已经成为端粒相关研究中的热点。目前对于TERRA的转录调控及生物学功能已有较为深入的了解。现对TERRA的生物学特性，功能和与疾病及衰老的关系进行综述，以期为TERRA后续的研究如作为疾病治疗靶点，延缓衰老等提供参考。
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