GLP-1-IgG4-Fc融合蛋白的表达与鉴定[广东省引进创新科研团队计划资助项目（201101Y0104990178）]

分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-03-13 合作期刊: 《中国生物工程杂志》

陈英 肖海鹏 张晓焰 龚庆伟 马利 李文佳 陈小锋

摘要： 将合成的人胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)突变体基因与IgG4抗体的Fc部分进行融合获得GLP-1-IgG4-Fc片段，获得的片段与pXC17.4载体进行连接，用电转化方法将线性化质粒稳定转染CHO-K1细胞，通过ClonePix 2筛选出高表达细胞株，产量达1.5 g/L。收集培养上清并经Protein A和Source 30Q纯化，得到的GLP-1-IgG4-Fc融合蛋白，SDS-PAGE纯度高于95%，HPLC纯度和CZE纯度均不低于80%，SEC纯度高于99%。经质谱和肽图谱测定，分子量与理论值一致，肽图谱序列与对照品高度一致。生物学活性分析表明，GLP-1-IgG4-Fc融合蛋白具有促进表达有GLP-1受体的HEK293细胞分泌cAMP的活性，并且该活性与对照品高度相似。

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