侵入细胞内的牙龈卟啉单胞菌影响人牙周膜细胞的增殖及成骨分化

分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2017-12-27 合作期刊: 《南方医科大学学报》

周蕾 胡永莲 武世伍 俞岚 承泽农 朱博

摘要： 目的 探究活体牙龈卟啉单胞菌（P. gingivalis）侵入人牙周膜细胞（HPDLCs）后，对细胞增殖性能及成骨向分化作用的影响。方法 将P. gingivalis与HPDLCs以感染复数（MOI）为10、100共培养90 min、8、24 h后，利用细胞侵袭实验比较不同时间及MOI值下，P. gingivalis对HPDLCs的侵袭效能。用CFDA-SE（Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester, C29H19NO11）标记HPDLCs，加入P. gingivalis后共培养8、24、48、72 h，流式细胞仪检测细胞增殖性能的变化。将SYTO9标记的P. gingivalis与HPDLCs共培养24 h后，流式细胞荧光分选技术（Fluorescence activated Cell Sorting, FACS）分选出被感染细胞，利用实时荧光定量PCR对Runx2基因进行检测，并且对分选出的细胞进行矿化诱导，分别于7、14、21 d，进行茜素红染色检测HPDLCs矿化结节形成。结果 P. gingivalis与 HPDLCs共培养 90 min后，即可进入细胞内，共培养 24 h后，侵袭效能达到最大值。被 P.gingivalis感染后，细胞的Runx2基因表达明显下调，且其矿化结节的形成明显低于对照组。结论 侵袭进入HPDLCs内的活体P. gingivalis，未对细胞的增殖产生明显的影响，但可以明显抑制细胞的成骨分化作用，这可能是通过下调 Runx2的表达来实现的。

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