逆转录病毒介导shRNA抑制Mig-7基因对人肝癌细胞血管生成拟态及体外侵袭转移的抑制作用

分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2017-12-21 合作期刊: 《南方医科大学学报》

屈波 盛冠男 余飞 陈冠男 吕琪 毛中鹏 郭龙 吕毅

摘要： 目的 探讨逆转录病毒介导的短发夹RNA（shRNA）干扰迁移诱导基因7（Mig-7）对肝细胞癌（HCC）细胞血管生成拟态（VM）形成及体外侵袭转移能力的影响。方法 设计2条Mig-7 mRNA寡核苷酸序列（Mig-7 shRNA-1，Mig-7 shRNA-2）和1条作为负对照的无关序列（Mig-7 shRNA-N）。构建Mig-7shRNA逆转录病毒表达载体质粒，并将要接受转染的人肝癌细胞MHCC-97H分为6组：转染Mig-7 shRNA-1组；转染Mig-7 shRNA-2组；转染Mig-7 shRNA-N组；转染空载质粒组（Vector）；重组人血管内皮抑素（ES，商品名：恩度）组；MHCC-97H细胞对照组（Control）。半定量PCR、Western blot检测其对Mig-7表达的影响；三维细胞培养观察其对VM形成的影响；细胞间粘附实验、Transwell侵袭实验及迁移实验观察其对细胞粘附、侵袭及迁移能力的影响。结果 转染后，Mig-7 shRNA-1组与Mig-7 shRNA-2组中Mig-7 mRNA与蛋白的表达、MHCC-97H细胞形成VM能力、细胞侵袭、迁移能力明显减低（P<0.05），细胞间粘附能力明显增加（P<0.05）；Mig-7 shRNA-N组、Vector组、ES组中MHCC-97H细胞Mig-7的表达、VM形成、细胞间粘附、迁移、侵袭能力较MHCC-97H细胞组均无明显变化。结论 逆转录病毒介导的shRNA能够有效下调Mig-7的表达并明显抑制HCC细胞VM形成能力及侵袭转移能力，增加细胞间的粘附作用；ES对HCC细胞的Mig-7表达、VM形成、侵袭转移及粘附能力无明显影响。

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