分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-01-15 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 目的：从产品开发角度分析寡核苷酸类药物的发展现状和未来趋势。方法：检索科睿唯安（Clarivate Analytics）的Cortellis数据库的数据，利用定量分析法和对比分析法对检索结果进行分析。结果：目前已有7种寡核苷酸类药物上市，4种寡核苷酸类药物处于预注册及16种处于临床Ⅲ期，未来市场上的寡核苷酸类药物将呈现快速增长趋势。此外，寡核苷酸类药物的商业交易也越来越多，目前共发生包括药物开发及商业化许可、专利资产出售以及早期药物研发合作等10余起交易，其中药物开发及商业化许可是最主要的交易模式。结论：虽然寡核苷酸类药物市场尚处于起步阶段，但随着未来技术的不断发展改进，相信未来有更多的寡核苷酸类药物上市，为癌症及其他疾病的治疗提供新的契机。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-01-15 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 【背景】对虾白斑综合征病毒(White Spot Syndrome Virus ,WSSV)是对虾养殖业中危害最严重的病毒之一，至今尚无规模应用的有效药物防治方法。但近年来在WSSV免疫防治上进展较大。Vp28蛋白是WSSV囊膜上的主要结构蛋白，2004年以来其编码基因已在8种宿主中表达成功，在实验室试验中对WSSV的防治疗效显著，但目前尚未见到其在对虾产业中的应用。【目的】利用对虾的天然饵料聚球藻表达Vp28重组蛋白，这种药食同源可简化操作，降低成本，有助其在生产中应用。【方法】用荧光定量PCR方法检测转vp28基因聚球藻7942中vp28基因的表达效率。通过氧电极的方法测得转vp28基因型聚球藻在不同温度、光照、pH和盐度下的光合活性变化，找到它的最适生长条件。【结果】检测了vp28基因表达效率为9.52％，是在鱼腥藻7120表达效率的三倍。最适采收时间是对数生长后期（15d左右）。转基因型蓝藻7942的最适生长条件是：温度为40 ℃，盐度为0-0.1 mol Nacl /L，pH为7.5，光强450 μmol·m-2·s-1。【结论】本研究确定了vp28基因在聚球藻中的表达效率及该转基因藻的最适培养条件，这些研究结果为用转vp28基因型聚球藻7942规模制备药食同源的口服剂提供了依据。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-01-15 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 根据信号肽N端电荷数，选择Sec及Tat两种途径的信号肽构建枯草芽孢杆菌穿梭质粒，首次实现Bacillus cereus源亮氨酸脱氢酶基因在Bacillus subtilis中的分泌表达。Tat途径信号肽PhoD促进蛋白分泌的效果最好，胞外酶活力达20.25U/ml，为不添加信号肽的2.2倍，信号肽N端较多的电荷数，可能有利于多聚体蛋白的分泌。对表达产物进行纯化和酶学性质测定。结果表明，纯酶比酶活为13U/mg；L-Leucine为底物时酶的Km为6.17mM，Vmax为14.49umol·min-1·mg-1；底物特异性研究发现，酶与天然底物L-Leucine的亲和性最好，对一些脂肪族氨基酸也有活性，对芳香族氨基酸L-Phenylalanine无活性；酶的最适pH为10.5~12，pH稳定范围为5.0-11.0；最适反应温度为55℃；圆二色谱变温扫描酶二级结构变化，α螺旋含量随温度升高逐渐降低；差示扫描微量热技术(DSC)测定酶的解折叠温度（Tm值）为64.13℃，表明该酶具有较好耐热性。
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