分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-12-22 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 对人源类溶菌酶蛋白6（human lysozyme-like protein 6，LYZL6）在受精过程中的作用进行研究，并对重组LYZL6蛋白（recombinant LYZL6，rLYZL6）的生理特性进行分析，从而揭示其生理功能。细胞免疫荧光法确定LYZL6定位于成熟精子头部的顶体后区域，反转录PCR（RT-PCR）分析表明精子表面的LYZL6蛋白来源于睾丸和附睾的分泌，Western blot法分析表明精子获能前后表面LYZL6的量无明显改变。半透明带结合实验和精子穿透实验分析表明兔抗LYZL6血清未明显抑制人精子结合透明带，但可明显抑制精卵融合。利用毕赤酵母表达系统成功表达了rLYZL6，使用甲壳素亲和层析和凝胶过滤层析可从发酵上清中纯化到具有生物活性的rLYZL6。酶联免疫吸附法（ELISA）分析显示rLYZL6不具有透明质酸结合能力、透明质酸水解能力和自由基清除活性，但具有较强的肽聚糖结合能力和异肽酶活性。LYZL6由睾丸和附睾分泌后定位于成熟精子头部的顶体后区域，可以参与精卵融合，并具有肽聚糖结合能力和异肽酶活性，提示LYZL6可能通过多种机制参与精子
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-12-22 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 猪链球菌是一种传染性革兰氏阳性细菌，是严重影响养猪业发展的重要人畜共患病原体，造成人类死亡率在5％到20％之间。其毒力因子在致病过程中发挥着重要作用。近年来对猪链球菌2型的毒力因子研究有诸多新的进展，对其致病机理的了解和对该病有效防控都有新的认识。本文对近些年研究2型猪链球菌毒力相关因子，在蛋白类、酶类研究新进展，同时对毒力因子基因表达双组份系统、与宿主免疫系统相互作用的IV型分泌系统的进展进行总结和分析，以期为猪链球菌病的治疗和疫苗的研制提供新参考。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-12-22 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 目的:研究白花地胆草（Elephantopus mollis H.B.K）的乙醇提取物EM-12抗肿瘤作用分子机制。方法:MTT检测EM-12对卵巢癌细胞活性影响；克隆形成抑制实验检测EM-12对卵巢癌细胞增殖能力的影响; GSEA（Gene set enrichment analysis）分析EM-12对卵巢癌2774-C10细胞的影响; PI单染检测细胞周期; Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡; Western blotting检测细胞凋亡、周期相关蛋白。结果:MTT实验结果表明，EM-12可以显著抑制卵巢癌细胞的活性；RNA-seq及GSEA分析表明EM-12诱导2774-C10发生G1/S期阻滞；克隆形成抑制实验结果表明,EM-12可以显著抑制卵巢癌细胞的增殖；流式细胞术结果表明随着药物浓度的增加,凋亡率逐渐增加,并且G1期细胞比例逐渐增加，S期细胞比例减少，发生G1/S期阻滞。Western blotting结果表明,随着药物浓度的增加cyclin E2、Cyclin D1、CDK2、CDK6蛋白水平下降 ,并伴随caspase-8、Caspase-3活化及多聚ADP核糖聚合酶PARP酶切失活。 结论:EM-12诱导卵巢癌细胞发生G1/S期阻滞,且通过死亡受体通路诱导细胞凋亡。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-12-22 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 酸脱氢酶具有重要的意义。为了获得理想的R-扁桃酸脱氢酶，本研究采用基因组挖矿技术从Lactobacillus harbinensis菌株中获得了一个新型的R-扁桃酸脱氢酶LhDMDH，重组LhDMDH的比酶活高达1264.3 U/mg，约为探针的4倍，在已报道的R-扁桃酸脱氢酶中处于领先水平。同时，考察了4个重组酶主要的酶学特性，它们的最适反应温度在25~30℃，最适反应pH在9.0~9.5。动力学参数的结果表明，LhDMDH对底物的Kcat值为30.28 S-1，明显高于其它重组酶。此外，底物谱分析的结果也表明LhDMDH在外消旋扁桃酸的手性拆分及苯乙酮酸的生物合成中更具优势。本研究在R-扁桃酸脱氢酶基因挖掘方面取得了较为理想的结果，为进一步的改造及应用奠定了坚实的基础，也为其它酶的挖掘提供了可资借鉴的经验。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-12-22 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 研究探索自组装短肽R2I4R2在人皮肤成纤维细胞体外三维培养的应用效果与对创伤修复过程的作用。通过圆二色谱仪分析不同理化条件对其二级结构的影响；刚果红染色宏观检测短肽自组装情况；体外培养人皮肤成纤维细胞探索细胞在R2I4R2形成的纳米纤维网络中的生长状态及凋亡情况；建立SD大鼠皮肤创伤模型，HE染色与免疫组织化学检测其对皮肤创伤修复的病理变化。结果表明，R2I4R2在不同条件下均可形成较为稳定的二级结构；自组装24h后可形成均一稳定的膜片状装结构，为细胞三维培养提供支架；人皮肤成纤维细胞可在R2I4R2形成的纳米纤维网络三维环境中生长且状态良好；动物实验表明，短肽R2I4R2可减少炎症、促进新生血管生成、加速皮肤创伤修复过程。自组装短肽R2I4R2作为新的纳米支架材料，可用于细胞三维培养与皮肤创伤修复。
分类： 数学 >> 离散数学和组合数学 提交时间： 2017-12-22
摘要： 本文利用代数和组合的相关理论对超平面配置理论的自由性做出了相关研究，给出圈图所对应的图配置的生成元和导模的具体形式，并以图论的形式对圈图配置的导模及其自由解做出相关的组合解 释.
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