山羊毛囊外根鞘细胞系的建立

分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-11 合作期刊: 《动物营养学报》

崔志峰 于会国 张 忠 王 慧 曾勇庆

摘要： 本试验旨在建立纯一、稳定的山羊毛囊外根鞘细胞系。活体采集济宁青山羊羔羊背部皮肤，采用机械分离与酶消化相结合的方法，分离外根鞘细胞，培养于含有表皮生长因子（EGF）、类胰岛素生长因子-Ⅰ（IGF-Ⅰ）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和氢化可的松的无血清角质细胞培养液中，置5% CO2浓度的37 ℃培养箱中启动原代培养。待原代细胞长成良好的单层后即可进行传代培养，细胞经传代培养至第8~10代时，更换含EGF、IGF-Ⅰ、bFGF、氢化可的松和FBS的DMEM/F12培养液进行长期培养。选取传至第40代的外根鞘细胞进行生长特性研究与染色体分析。结果表明：体外培养的细胞倍增时间为51.9 h，培养细胞的染色体数仍以2n=60为主，但是出现了非整倍体性染色体特征；免疫细胞化学鉴定结果表明，该细胞系角蛋白19表达呈阳性。结果提示，本试验分离培养的细胞确为由山羊毛囊干细胞分化来的外根鞘细胞，体外培养的山羊毛囊外根鞘细胞系得到了成功建立。

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