过氧化氢诱导斜带石斑鱼原代肝细胞氧化损伤模型的构建

摘要: 本试验以斜带石斑鱼原代肝细胞为研究对象，以过氧化氢作为刺激源，以肝细胞存活率和抗氧化指标的变化为判断指标，旨在建立稳定的斜带石斑鱼原代肝细胞氧化损伤模型。在原代肝细胞培养液中分别添加0（对照）、100、200、400、600、800和1 000 μmol/L H2O2，使之分别作用2、4、6、8、12和24 h，共42组，每组10个重复，测定肝细胞存活率。在得出适宜过氧化氢作用时间的基础上，使每个浓度的过氧化氢（每个过氧化氢浓度设6个重复）作用于肝细胞适宜时间后，收集肝细胞和培养液测定抗氧化指标，筛选使肝细胞发生氧化损伤的适宜过氧化氢作用浓度。结果显示：800 μmol/L过氧化氢作用肝细胞8 h，斜带石斑鱼肝细胞的存活率降低至61.98%；800和1 000 μmol/L组与其他各组相比，肝细胞超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶（600 μmol/L组除外）和过氧化氢酶活性显著降低（P＜0.05），丙二醛与脂质过氧化物含量显著升高（P＜0.05），但800和1 000 μmol/L组之间差异不显著（P>0.05）。以上结果表明，过氧化氢作用浓度为800 μmol/L、作用时间为8 h，可作为建立斜带石斑鱼肝细胞氧化损伤模型的适宜条件。