融合抗菌肽基因在重组毕赤酵母的表达 及体外活性研究 后印本

摘要: 目的：在毕赤酵母SMD1168中表达融合抗菌肽，并检测其体外抑菌活性。方法：本实验从实验室先前构建的重组质粒pVAX1-RHKJT中克隆出已构建好的融合抗菌肽RHKJT基因片段，将RHKJT基因片段插入至pGAPZaA真核表达质粒中，通过PCR和测序验证，构建pGAPZα-RHKJT重组真核表达质粒，将线性化的pGAPZα-RHKJT电转化至毕赤酵母SMD1168中获得重组酵母SMDpG-RHKJT，并通过PCR和RT-PCR验证，对重组毕赤酵母SMDpG-RHKJT进行发酵，并收集发酵上清液进行体外生物活性测定。结果：成功获得重组酵母SMDpG-RHKJT菌株，重组酵母发酵上清液对大肠杆菌标准菌、大肠杆菌耐药菌、沙门氏菌标准菌、金黄色葡萄球菌标准菌、金黄色葡萄球菌耐药菌、肺炎链球菌标准菌均具有显著的抑菌活性。结论：重组酵母表达的融合抗菌肽具有较广的抗菌谱和较高的抑菌活性，具有良好的潜在应用前景。