• 紫玉兰‘红元宝’花芽分化阶段基因定量分析的内参基因筛选

    分类: 生物学 >> 植物学 >> 应用植物学 提交时间: 2021-12-19 合作期刊: 《广西植物》

    摘要: 为筛选紫玉兰‘红元宝’(Magnolia liliflora ‘Hongyuanbao’)二次花芽分化阶段稳 定表达的内参基因,该文以‘红元宝’不同花芽分化时期的花芽、叶为材料,基于转录组 数据,筛选出8 个候选内参基因:泛素酶基因(UBC)、肌动蛋白(ACT)、微管蛋白β 链(β-TUB)、微管蛋白β-5 链(β-TUB5)、微管蛋白α-3 链(α-TUB3)、磷酸烯醇丙酮 酸羧化酶(PEPC)、酰基载体蛋白2(ACP2)、酰基载体蛋白3(ACP3)。运用Primer Premier 5 设计引物,简单克隆和熔解曲线验证引物特异性;利用qRT-PCR 技术检测各个 候选内参基因的表达情况,结合GeNorm、NormFinder、BestKeeper 软件和RefFinder 在 线工具综合评估其表达稳定性,并通过目的基因TFL1 的表达分析验证其可靠性。结果表 明:8 个候选内参基因条带位置正确,熔解曲线呈单一峰,说明引物特异性良好;综合4 个软件的分析结果发现,β-TUB、β-TUB5 和α-TUB3 是‘红元宝’不同花芽分化时期较为 稳定的内参基因,而UBC 和ACT 为稳定性最差的内参基因;以单个内参基因和β-TUB5、 α-TUB3、β-TUB 组合为参照对TFL1 基因进行相对表达量分析,结果显示,β-TUB5、α- TUB3、β-TUB 及其组合的相对表达量趋于一致,而ACT 和UBC 并未对目的基因的表达 量进行有效的标准化。因此,β-TUB、β-TUB5 和α-TUB3 可作为‘红元宝’二次花芽分化 研究中稳定表达的内参基因。该研究结果将为木兰属植物二次成花分子调控机制研究提供 依据。

  • 粤紫萁离体再生技术研究

    分类: 生物学 >> 植物学 >> 应用植物学 提交时间: 2020-01-12 合作期刊: 《广西植物》

    摘要: 粤紫萁(Osmunda mildei)为新近形成的自然杂交种,分布区狭窄,种群个体数量少,有性繁殖能力极低。本研究以孢子为外植体, MS、3/4MS、1/2MS和1/4MS为基本培养基,探究不同生长调节剂对粤紫萁孢子萌发、原叶体增殖和孢子体形成的影响。结果表明:粤紫萁孢子中极少的可育孢子在植物生长调节剂的作用下,能够萌发并发育形成原叶体;原叶体生长及增殖的最适组合为1/2MS +1 mg·L-1 6-BA+NAA 0.05 mg·L-1和1/2MS +1 mg·L-1 6-BA+IBA 0.5mg·L-1;在1/4MS基本培养基中,原叶体增殖的同时,生长发育完善,形成正常的幼孢子体,形成率达83.49%;孢子体最佳生根配方为MS+IBA 0.5 mg·L-1;组培苗在河沙:黄土:腐殖质=1:1:3的栽培基质中成活率达98%以上,且生长旺盛。本研究对粤紫萁的人工繁育及其资源保护具重要意义,同时也可为其他濒危蕨类植物的人工保育提供参考。