分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2017-12-07 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要： 目的探讨B淋巴细胞活化因子(BAFF )在视神经脊髓炎(NMO)患者血清及脑脊液中的表达情况及临床意义。方法收集44例NMO患者及38例多发性硬化(MS )患者的临床资料，患者均为急性复发期。30例健康人和15例非炎性神经系统疾病患者分别作为对照组，采用酶联免疫吸附测定((ELISA)方法检测血清及脑脊液中BAFF水平。结果NMO组、MS组和对照组血清中B AFF水平分别为250.2±126.9,249.6±130.7和222.9±126.1 pg/m1,3组间两两比较，差异无统计学意义(P>0.05 ) 。NMO组、MS组和对照组脑脊液中B AFF水平分别为525.8±230.0,298.4±141.9和141.4±76.2 pg/ml, 3组间两两比较，NMO组和MS组脑脊液中B AFF水平较对照组明显增高，NMO组脑脊液中B AFF水平较MS组明显增高(P<0.05 )。且NMO组、MS组脑脊液中B AFF水平与EDSS评分存在相关性，EDSS评分越高，其脑脊液中B AFF水平越高。但是NMO组脑脊液中B AFF水平与AQP4抗体滴度之间不具有相关性。结论脑脊液中B AFF水平可能是NMO和MS鉴别诊断的生物标记物，并在判定疾病严重程度方面具有重要价值。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-09-21 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 目的：构建携带金黄色葡萄球菌类肠毒素K（Staphylococcal Enterotoxin-like K, SElK）和绿色荧光蛋白（GFP）融合基因的工程菌，并对SElK-GFP融合蛋白进行初步生物学活性分析。方法：利用PCR和Overlap PCR克隆获得SElK-GFP融合基因，并插入pET28a表达载体中，通过菌落PCR，质粒双酶切及测序验证后，将构建成功的pET28a-SElK-GFP质粒转化到E.coli BL21菌株中进行诱导表达，通过 Ni+亲和磁珠试剂盒纯化获得SElK-GFP融合蛋白；并利用MTT法检测SElK-GFP刺激小鼠脾淋巴细胞增殖；ELISA法检测SElK-GFP尾静脉注射后小鼠血清中细胞因子IL-2和IFN-γ的分泌水平。结果：成功构建能够表达SElK-GFP融合蛋白的工程菌，纯化获得高纯度的SElK-GFP融合蛋白可观测到明显的绿色荧光，融合蛋白生物学活性分析表明，SElK-GFP能够呈剂量依赖性地显著刺激小鼠脾淋巴细胞增殖；同时ELISA检测发现SElK-GFP可显著增加小鼠血清中细胞因子IL-2及IFN-γ的分泌水平。结论：本研究成功克隆、表达及纯化获得高纯度的SElK-GFP融合蛋白，其不仅保留了SElK的超抗原活性，同时兼具GFP绿色荧光的可视性，为深入研究SElK生物学活性提供有利工具。
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