• 半蒴苣苔属植物染色体制片优化及染色体数目和倍性研究

    分类: 生物学 >> 植物学 >> 应用植物学 提交时间: 2022-08-05 合作期刊: 《广西植物》

    摘要: 染色体数目和倍性是系统与进化生物学和遗传学研究中十分重要的基础信息。苦苣 苔科半蒴苣苔属(Hemiboea)植物具有重要的药用价值和观赏价值,约 44 种,主要分布于 我国南部地区。因其根系细小且相互缠绕以及染色体小型的特点,获取其根尖材料进行 染色体制片研究染色体往往比较困难。目前该属仅有 3 种的染色体数目被报道,绝大部分 种的染色体数目和倍性尚不清楚。染色体数目的进化模式与物种的进化关系亦不清楚。为 了探索该属染色体制片的适宜条件及染色体数目与物种的进化关系,本研究根据半蒴苣苔 属植物具有叶片扦插繁殖的特性,采用叶片水培生根法来获取半蒴苣苔(Hemiboea subcapitata)、弄岗半蒴苣苔(H. longgangensis)、龙州半蒴苣苔(H. longzhouensis)、江西 半蒴苣苔(H. subacaulis var. jiangxiensis)、华南半蒴苣苔(H. follicularis)和永福半蒴苣苔 (H. yongfuensis)6 种植物的根尖材料,探索了不同实验条件对染色体制片效果的影响,对 染色体制片实验的条件进行了优化并进行染色体计数,同时基于半蒴苣苔属染色体数目 的进化历史探讨染色体数目的进化模式及其与物种进化的关系。结果表明:(1)上午 9:30-10:00 取材,解离 10 min 以及染色 15 min 为半蒴苣苔属染色体制片的适宜条件;(2) 确定了半蒴苣苔属上述 6 种植物均为二倍体,染色体数目均为 32(2n=2x=32);(3)除个别 物种染色体数目有变化外,该属大部分物种染色体数目可能为 2n=2x=32,且染色体数目变 化可能是非整倍化的作用,与物种进化没有明显关系。本研究为半蒴苣苔属以及具有类似 叶片再生植株特性的类群的染色体制片提供了参考,并为该类群的分类,系统进化等方面 的研究提供了启示。

  • Yeast two-hybrid 方法筛选 VISA 相互作用蛋白

    分类: 生物学 >> 生物工程 提交时间: 2017-06-01 合作期刊: 《中国生物工程杂志》

    摘要: 病原微生物感染对人类健康构成巨大威胁,先天免疫系统是生物体在长期进化过程中建立起来的天然保护系统。 VISA ( MAVS, CARDIF, IPS-1[1,2,3])是连接胞浆 dsRNA 受体 RIG-I 与下游信号转导通路的一个接头蛋白,研究结果表明 VISA 无论在 TLR3 非依赖的或者 TLR3 介导的抗病毒IFN 信号途径中都具有关键作用,但目前对 VISA 信号转导的详细机制还不十分清楚。更多 VISA 相互作用蛋白的发现以及它们之间的作用机制的研究能完善我们对 VISA 参与的信号转导机制的认识。本实验利用酵母双杂交系统,用 VISA 蛋白的全长做诱饵( Bait )筛选 293 T 细胞 cDNA 表达文库,并结合免疫共沉淀实验,双荧光素酶报告基因系统验证筛选到的阳性克隆和 VISA 作用的真实性。通过酵母双杂交系统成功筛选到 Sec13L1 候选基因并验证了其与 VISA 的全长蛋白相互作用,在 293 T 细胞中过表达这个基因,研究结果显示 Sec13L1 过表达能促进 VISA 对 IFNβ 的诱导,并存在剂量效应。