分类： 医学、药学 >> 临床医学 提交时间： 2023-11-14 合作期刊: 《中国全科医学》
摘要： 背景 肝细胞癌是癌症相关死亡的主要原因，目前的防治形势依然严峻，对新的肝细胞癌治疗药物进行探索研究具有科学意义。目的 通过网络药理学方法分析汉黄芩素干预肝细胞癌的作用机制，并进行体外实验验证。方法 在 TCMSP 数据库中检索汉黄芩素的药物靶点，从 TTD、GenCard、OMIM、DisGent 数据库中收集肝细胞癌的疾病靶点。将收集的药物靶点和疾病靶点取交集，作为药物干预疾病的潜在靶点。对交集靶点运用 R 软件进行富集分析，使用 STRING 数据库和 Cytoscape 软件对交集靶点构建蛋白互作网络和筛选核心靶点。在 GIEPA 数据库对核心靶点进行近一步分析。最后通过体外实验对前期分析结果进行验证：采用 CCK-8 试剂盒测定细胞活性；采用平板克隆形成实验测定细胞增殖；采用划痕实验测定细胞迁移；采用 Western-blotting（WB）实验测定蛋白质表达水平。结果 分析结果发现汉黄芩素的 AMDE 特性符合小分子药物成药规则并且毒性分析结果表明无毒性。收集到汉黄芩素靶点 135个，肝细胞癌靶点 8 238 个，两者交集靶点 113 个。通过对构建的蛋白互作网络筛选出的 TOP10 的核心基因进行分析，发现 CDK1、SRC 在肝癌组织中 mRNA 水平较正常肝组织上调（P<0.05），并且在肝癌患者中高表达与不良预后相关（P<0.05）。KEGG 富集分析发现交集基因富集在 PI3K/AKT 信号通路上最多，分子对接结果显示汉黄芩素与 CDK1、SRC 结合构型活力较强。CCK-8 试剂盒检测结果显示，加入汉黄芩素 75、150、300.0 mol/L 组 HepG2 细胞活性均低于对照组（P<0.05）；平板克隆形成实验结果显示，加入汉黄芩素 37.5、75、150.0 mol/L 组 HepG2 细胞克隆形成数均低于对照组（P<0.05）；划痕实验结果表明，加入汉黄芩素 37.5、75、150.0 mol/L 组 HepG2 细胞迁移率均低于对照组（P<0.05）；WB 实验结果表明，加入汉黄芩素 75、150.0 mol/L 组 PI3K、P-AKT/AKT、CDK1、SRC 蛋白表达水平均低于对照组（P<0.05）。结论 汉黄芩素通过下调 CDK1、SRC 蛋白表达，减弱 PI3K/AKT 通路信号，抑制肝癌细胞增殖和迁移，诱导细胞凋亡，从而达到干预肝细胞癌发生和进展的目的。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-23 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在研究饲粮中胆碱添加水平对3～5月龄獭兔肝脏脂肪代谢的影响。选用200只体重相近的3月龄獭兔，随机分成5组（每组40个重复，每个重复1只），分别饲喂在基础饲粮基础上添加0（对照）、200、400、600和800 mg/kg的50%氯化胆碱（折算为胆碱的添加水平后分别为0、87、174、261和348 mg/kg）的试验饲粮，试验饲粮实测胆碱水平分别为800、900、1 000、1 100和1 200 mg/kg。预试期7 d，正试期53 d。结果表明：饲粮中胆碱添加水平显著影响肝脏中单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸的含量（P<0.05）。与对照组相比，饲粮中添加7、174、261和348 mg/kg的胆碱显著增加血清中类胰岛素样生长因子1（IGF-1）和瘦素（LEP）的含量（P<0.05），饲粮中添加174和261 mg/kg的胆碱显著增加血清中生长激素（GH）的含量（P<0.05），饲粮中添加261和348 mg/kg的胆碱显著增加血清中脂蛋白酯酶（LPL）的活性和极低密度脂蛋白（VLDL）的含量（P<0.05），饲粮中添加261 mg/kg的胆碱显著提高肝脏中肉碱棕榈酸转移酶1（CPT1）mRNA的表达水平（P<0.05）。综上所述，饲粮中添加261 mg/kg的胆碱（饲粮实测胆碱水平为1 000 mg/kg）改变了獭兔肝脏中脂肪酸组成，促进了肝脏中脂肪酸氧化关键基因CPT1的表达，同时加强了肝脏中甘油三酯（TG）的输出过程。
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